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高效液相色譜日常維護要點-沖洗

更新時間:2022-05-31 點擊次數(shù):3227
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哈嘍哈嘍大家好,小編又來了。之前小編已經(jīng)帶大家詳細了解了脫氣和過濾的基本原理和一些日常處理方法,今天就帶大家來了解一下高效液相色譜日常維護最后一個要點-沖洗。

相信各位老師一定深有感觸,要使HPLC系統(tǒng)能夠良好運行的第三個要點是保持液相系統(tǒng)的清潔。日常使用時,我們需要關注流動相流經(jīng)該系統(tǒng)的所有地方,一般都是建議對儲液瓶,泵,自動進樣器,色譜柱,檢測器這些地方做經(jīng)常性的沖洗,這樣將會使你的系統(tǒng)隨時保持最佳狀態(tài)。


01 儲液瓶

首先流動相應根據(jù)用量合理配置,建議最好是現(xiàn)配現(xiàn)用。其次的話要經(jīng)常清洗流動相儲液瓶,最好是更換一次流動相沖洗一次儲液瓶。

我們又可以分為幾種不同沖洗方式。

一般清洗:直接用純化水沖洗。適用于盛裝純甲醇、純乙腈的貯存。

正常清洗:加入適量洗潔精,用毛刷刷洗;之后用純化水沖洗干凈。

干凈的標準:水不成股流下,也不掛壁。適用于盛裝含有緩沖鹽或無機酸等流動相的貯存瓶。

重點清洗:先用稀硝酸或鉻酸洗液潤洗,再用正常清洗項下的方法清洗。適用于有可能長霉的貯存瓶清洗,如夏天存放含大比例無機相的瓶子,以及存放流動相時間超過15天的瓶子。

清洗干凈標準除正常清洗項下規(guī)定外,同時用pH試紙測定,使其達到中性(純化水的pH值)。一定要保證最后的瓶子流出的水為中性,否則可能會對液相色譜儀或色譜柱造成損壞。

02 泵

接下來要沖洗的是泵。特別是當流動相中含有難揮發(fā)的緩沖液(如磷酸鹽)時。如果儀器不是連續(xù)使用,當流動相蒸發(fā)時, 難揮發(fā)物就會粘在活塞密封墊的表面,難揮發(fā)物將形成固形物沉淀。這是泵密封墊磨損和單向閥滲漏的主要原因之一。

所以,無論使用長短,在停泵以前一定要用非緩沖液流動相沖洗泵在半個小時以上,要是流動相中有難揮發(fā)緩沖鹽則建議沖洗的時間應該更長些。

03 管路

針對管路的沖洗,如果以常規(guī)有機相試劑作為流動相的系統(tǒng),建議每次實驗完成后,用高比例有機相沖洗系統(tǒng)90分鐘以上(90%的甲醇水溶液,或者用90%乙腈水溶液)。

如果流動相中含有酸堿鹽的的系統(tǒng),建議先斷開保護柱和色譜柱,用純水沖洗泵和進樣器管路30分鐘(流速1.0mL/min),沖洗過程中應保證進樣器分別在load和inject狀態(tài)各沖洗15min,之后應進行過渡,首先用高比例水相(10%甲醇水溶液,或者用50%乙腈水溶液)過渡系統(tǒng)90分鐘,之后再用常規(guī)有機相試劑作為流動相系統(tǒng)方法沖洗。


04 自動進樣器

自動進樣器也要按規(guī)定清洗?,F(xiàn)在的儀器多配有自動進樣器的沖洗液瓶,通常只要注意及時更換、補充沖洗液即可。

05 色譜柱

色譜柱的污染也會隨使用時間而增加。通常表現(xiàn)是:色譜柱壓升高,峰形異常,柱效下降,分離度異常等。

預防這個問題的zui有效方法:在每一批樣品分析結束后或準備卸下柱子時,將我們的色譜柱按照對應的說明書做好日常維護工作。


06 檢測器

針對檢測器的沖洗,可以依據(jù)檢測器其性質(zhì)并按照說明書規(guī)定進行洗。例如UV/VIS檢測器或FL檢測器,在對柱子和系統(tǒng)進行沖洗時也就一同對檢測器流通池中污染物進行了清洗。但是蒸發(fā)光檢測器或質(zhì)譜儀則需要按照說明書進行定期清洗。這些檢測器在使用時會有難揮發(fā)污染物沉積,如質(zhì)譜儀離子源的噴針、毛細管、錐孔板、預四極等部件,因而需要定期清洗。

到此,針對高效液相色譜日常維護要點就給大家介紹的差不到了,如果想要實驗室日常使用的液相色譜儀能夠正常高效的運行,以上日常維護都是必bu可少的。



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